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分子荧光分光光度计如何测测定维生素B2含量?
  • 发布日期:2020-09-25     信息来源:      浏览次数:276
    •    分子荧光分光光度计具有性能稳定,使用方便等特点,能够轻松满足对荧光样品进行定性、定量分析的需求。独特光学设计使仪器结构更加紧凑,从而占用更小的实验台面积。支持单机和联机两种操作模式。基于Microsoft Windows的控制及分析软件的简洁易用,可轻松地进行参数设置、数据采集和数据处理。

        任何荧光物质都具有激发光谱和发射光谱,发射波长总是大于激发波长。荧光激发光谱是通过测定荧光体的发光通量随波长变化而获得的光谱,反映不同波长激发光引起荧光的相对效率。荧光发射光谱是当荧光物质在固定的激发光源照射后所产生的分子荧光,是荧光强度对发射波长的关系曲线,表示在所发射的荧光中各种波长相对强度。由于各种不同的荧光物质有它们各自特定的荧光发射波长,可用它来鉴定荧光物质。有些发荧光的物质其荧光强度与物质的浓度成正比,故可用荧光分光光度法测定其含量。
        分子荧光分光光度计对维生素含量的定性分析:
        1.移取5ml维生素B2标准溶液于25ml容量瓶中,用0.5mol/LHAc稀释至刻度,摇匀,放入石英吸收池中。在700V电压中,在450nm—600 nm范围内扫描标准溶液的发射光谱,通过谱图的分析,确定其佳荧光发射峰波长(522nm)。
        2.设荧光发射峰为步骤1获得的荧光发射峰波长,在350nm—500 nm范围内扫描标准溶液的激发光谱,确定其佳荧光激发峰波长(371nm)。
        3.将上面获得的激发波长为激发波长,扫描名物质的荧光光谱,观察所得到的光谱与上面得到光谱的异同。
        分子荧光分光光度计对维生素含量的定量分析:
        1.标准曲线制作:准确取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml维生素B2标准溶液于5个25ml容量瓶中,用0.5mol/LHAc稀释至刻度,摇匀,在激发波长371nm,荧光波长522nm处测定荧光强度,以浓度对荧光强度绘制标准曲线。
        2.维生素B2含量测定:取2.0ml维生素B2待测溶液于25ml容量瓶中,用0.5mol/LHAc稀释至刻度,摇匀;在激发波长371nm,荧光波长522nm处测定荧光强度,根据标准曲线计算维生素B2含量。

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